Development of polyresistance in microorganisms during antibiotic therapy in a multidisciplinary hospital during a pandemic COVID-19

Full Text

Введение

История проблемы устойчивости микроорганизмов к антимикробным препаратам (АМП) начинается с 1940 г., когда E. Abraham и E. Chain еще до начала клинического применения пенициллина обнаружили штамм Escherichia coli, резистентный к его действию [1].

Появление устойчивости микроорганизмов к АМП – это естественный приспособительный процесс к неблагоприятным условиям среды их обитания, однако нерациональное и чрезмерное использование АМП ускоряет его, способствуя быстрому снижению эффективности антибактериальных средств.

Согласно данным Всемирной организации здравоохранения, отсутствие эффективных АМП создает повышенную угрозу успешному лечению инфекций, в том числе при выполнении сложных хирургических операций и осуществлении химиотерапии онкологических больных, приводит к увеличению медицинских расходов, росту смертности населения и, в конечном итоге, к развитию глобального кризиса систем здравоохранения, связанного с антибиотикорезистентностью [2, 3].

В целях оценки масштаба угрозы и получения достаточного количества необходимых данных учеными при участии Оксфордского университета в 2000–2018 гг. организовано и проведено проспективное продольное исследование потребления АМП в 204 странах мира, а в 2019 г. – глобальное исследование бактериальной устойчивости к АМП – систематический анализ (GRAM). Результаты показали, что потребление АМП за последние два десятилетия во всем мире увеличилось на 46%. При этом в 2019 г. 4,95 млн летальных исходов были связаны с антибиотикорезистентностью, из которых около 1,27 млн произошли вследствие бактериальных инфекций, устойчивых к АМП, в 95% случаев вызванных шестью ведущими патогенами: E. coli, Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae, Streptococcus pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa. Одновременно на долю инфекций нижних дыхательных путей, связанных с резистентностью, пришлось 1,5 млн смертей [4, 5].

В настоящее время эксперты прогнозируют, что к 2050 г. смертность от инфекций, связанных с антибиотикорезистентными штаммами микроорганизмов, способными вызывать внутрибольничные инфекции, превысит 10 млн человек в год.

Всемирная организация здравоохранения еще в феврале 2017 г. включила состав микроорганизмов, схожий с указанным в метаанализе GRAM, в список приоритетных патогенов, представляющих наибольшую угрозу для пациентов больниц и лечебно-реабилитационных центров, способных вызывать тяжелые, часто смертельные инфекции кровотока и пневмонии [2]. Согласно исследованиям, у данных бактерий сформировалась устойчивость к действию широкого ряда АМП, являющихся эффективными средствами для пациентов с тяжелой грамотрицательной инфекцией, созданных на замену препаратам пенициллинового ряда, включая цефалоспорины II, III поколений и карбапенемы [6].

Устойчивость к АМП является проблемой, требующей комплексного многовекторного подхода при соответствующей финансовой поддержке в целях поиска удовлетворительного решения [7].

Аналогичные исследования с подобными результатами по оценке изолятов – возбудителей госпитальных инфекций – проводились в медицинских стационарах России – ЭРГИНИ, МАРАФОН [8, 9].

В последнее время проблему антибиотикорезистентности усугубило широкое бесконтрольное применение АМП в составе схем лечения пациентов с новой коронавирусной инфекцией (COVID-19), вызываемой вирусом SARS-CoV-2, причем нередко при отсутствии убедительных признаков присоединения бактериальной инфекции [10]. Как показывают многочисленные исследования, во время пандемии COVID-19 АМП получали до 90% пациентов, в то время как зарегистрированный уровень сопутствующей бактериальной инфекции не превышал 6–8%. Рядом медицинских профессиональных организаций [11] неоднократно упоминалось, что АМП не активны в отношении вирусов, в том числе COVID-19. Как и любая другая вирусная инфекция, COVID-19 не является показанием для применения АМП. Поражение легких при COVID-19 связано как с непосредственным вирусным повреждением легочной паренхимы, так и с иммунными механизмами – развитием синдрома цитокинового шторма с активацией макрофагов. На приведенные факторы АМП не оказывают воздействия. Однако чрезмерное эмпирическое применение АМП сохраняется, несмотря на обновленные рекомендации, предупреждения специалистов и отсутствие реального положительного эффекта [11, 12].

Цель – провести ретроспективное исследование влияния применения АМП на изменение микробиологического пейзажа и резистентности грамотрицательных микроорганизмов в отделениях реанимации и интенсивной терапии (ОРИТ) многопрофильного стационара в условиях пандемии COVID-19 в 2020–2021 гг.

Материалы и методы

В ретроспективном исследовании, проведенном в 2020–2021 гг., проанализированы выделенные от больных и с поверхностей внешней среды в ОРИТ госпитальные штаммы микроорганизмов – 1379 и 15 изолятов соответственно, всего – 1394, а также исследована степень их резистентности. Кроме того, 60 изолятов дополнительно исследованы на наличие генов резистентности. Сравнивались данные, полученные в ОРИТ для соматических больных (ОРИТ СБ) и в ОРИТ для инфекционных больных (ОРИТ ИБ) с COVID-19. Ввиду небольшого количества изолятов с поверхностей госпитальной среды, выявленных за исследуемый период в ОРИТ, произведен только их статистический учет.

Идентификацию и определение чувствительности микроорганизмов осуществляли на бактериологических анализаторах BD Phoenix M50 (USA) и Vitek 2 Compact (bioMerieux, France). Анализ генов β-лактамаз производили методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени с помощью комплектов реагентов AmpliSens ЦНИИ эпидемиологии Роспотребнадзора на амплификаторе «ДТпрайм 5» компании «НПО ДНК-Технология» с программным обеспечением FRT manager ООО «ИнтерЛабСервис» (Россия).

Проведен анализ изменения чувствительности микроорганизмов к значимым группам АМП – карбапенемам (меропенем), цефалоспоринам (цефтриаксон), фторхинолонам (левофлоксацин), аминогликозидам (амикацин), а также нарастания количества панрезистентных микроорганизмов. Результаты исследований оценивались в соответствии с критериями Европейского комитета по определению чувствительности к АМП (European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing – EUCAST), версия 10.0, 2020.

Результаты

Установлено, что во всех ОРИТ в 2020–2021 гг. превалировали грамотрицательные микроорганизмы – 78 и 70% (641 и 738) общего числа выделенных от пациентов соответственно, в составе которых, в свою очередь, в основном определялись K. pneumoniae, A. baumannii, P. aeruginosa, E. coli – более 85%, и др. (табл. 1).

 

Таблица 1. Высеваемость грамотрицательных микроорганизмов по видам в ОРИТ в 2020–2021 гг., %

Микроорганизмы	ОРИТ СБ	ОРИТ СБ	ОРИТ ИБ	ОРИТ ИБ
	2020 г., n=443	2021 г., n=453	2020 г., n=82	2021 г., n=115
K. pneumoniae	37,5	43,7	42,7	33
A. baumannii	14,7	15,7	34,1	48,7
P. aeruginosa	23,7	20,5	14,6	10,4
E. coli	10,6	10,4	2,4	5,2
P. mirabilis	4,1	1,8	3,3	0,9
S. marcescens	2,0	1,5	0.9	–
S. maltophilia	1,4	0,7	0.9	–
P. rustigianii	2,0	0,2	–	–
E. cloacae	0,5	1,5	0,9	–
Другие	3,7	4,0	0,2	1,8

Примечание. P. mirabilis – Proteus mirabilis, S. marcescens – Serratia marcescens, S. maltophilia – Stenotrophomonas maltophilia, P. rustigianii – Providencia rustigianii, E. cloacae – Enterobacter cloacae.

 

В ОРИТ СБ среди грамотрицательных микроорганизмов доминировала K. pneumoniae, причем ее прирост в 2021 г. по сравнению с 2020 г. составил 6,2%. В ОРИТ ИБ в 2020 г. отмечен ее подъем на 5,2% по сравнению с ОРИТ СБ этого же года, в то время как в ОРИТ ИБ в 2021 г. произошло снижение ее высева по сравнению с ОРИТ СБ этого же года и с ОРИТ ИБ 2020 г. на 10,7 и 9,7% соответственно.

В ОРИТ ИБ в 2021 г. в высевах доминировала A. baumannii, превзойдя высев K. pneumoniae более чем на 15%. Темпы роста высева A. baumannii составили в ОРИТ ИБ по сравнению с ОРИТ СБ около 19% в 2020 г., 33% – в 2021 г., а в ОРИТ ИБ в 2021 г. по сравнению с 2020 г. – около 15%.

Грамположительная флора в исследуемых отделениях ОРИТ в 2020 и 2021 г. составляла 22 и 30% соответственно с преобладанием Staphylococcus spp. – 55 и 68%. В связи с тем что в целом этиологическое значение грамположительной флоры невелико, в нашем исследовании она не рассматривалась.

В 2021 г. среди микроорганизмов, выделенных в ОРИТ ИБ, также выявлен значительный рост грибковой флоры рода Candida с преобладанием C. albicans. По сравнению с ОРИТ ИБ 2020 г. прирост грибковой инфекции составил 66%. В 2021 г. в 68% случаев выявлены C. albicans, в 10% – C. krusei, в 6% – C. glabrata (в 2020 г. не выявлялись), в 8% – C. tropicalis (17,6% – в 2020 г.), а также в небольшом проценте случаев выделялись C. dublinensis, C. lusitaniae, C. parapsilosis, с незначительными отличиями от 2020 г. Следует отметить, что в микробном п ейзаже 2021 г. стали появляться и другие диагностически значимые грибы, например Aspergillus spp. – 1 случай.

Отмечено, что выделенные от пациентов и превалирующие в исследуемых ОРИТ в 2020–2021 гг. штаммы микроорганизмов способны вызывать легочные инфекции бактериальной этиологии (рис. 1).

 

Рис. 1. Сравнительная характеристика ключевых патогенов из биоматериала нижних дыхательных путей от больных ОРИТ в 2020–2021 гг., %

 

На графике видно, что в ОРИТ СБ в 2020–2021 гг. из биоматериала пациентов в большей мере выделялась K. pneumoniae – 32 и 51% соответственно. В ОРИТ ИБ в 2021 г. уже в 56% случаев высевалась A. baumannii.

Распределение нозокомиальной микрофлоры в посеве биоматериала нижних дыхательных путей соответствовало выявленной общей тенденции доминирования микроорганизмов в ОРИТ в целом и подтверждает диагностическую значимость этиологического фактора при бронхолегочном синдроме.

На следующем этапе исследования рассмотрена устойчивость выделенных микроорганизмов к значимым группам АМП, в том числе штаммов K. pneumoniae и P. aeruginosa – к карбапенемам и цефалоспоринам III поколения, A. baumannii – к карбапенемам, а также определены микроорганизмы, сохраняющие максимальную чувствительность к АМП.

В результате проведенного сравнения резистентности возбудителей бактериальных осложнений в 2020–2021 гг. ОРИТ СБ с ОРИТ ИБ установлено, что почти в 2 раза увеличилось количество панрезистентных штаммов из числа патогенов: A. baumannii, K. pneumoniae, P. aeruginosa. При этом так называемая панрезистентность штаммов A. baumannii в 2021 г. увеличилась значительно: в ОРИТ СБ – на 64%, а в ОРИТ ИБ – на 91%, в то время как штаммы E. coli в 2021 г. в обеих сравниваемых группах сохранили достаточную чувствительность к АМП (табл. 2).

 

Таблица 2. Резистентность исследуемых микроорганизмов к АМП в ОРИТ в 2020–2021 гг., %

Микроорганизмы	АМП	ОРИТ СБ	ОРИТ СБ	ОРИТ ИБ	ОРИТ ИБ
		2020 г.	2021 г.	2020 г.	2021 г.
K. pneumoniae	Карбапенемы	61,4	81,3	77,1	78,9
	Цефалоспорины	82,5	89,9	94,3	100
	Аминогликозиды	40,4	49,5	48,6	57,9
	Панрезистентные	16,9	26,3	28,6	39,5
A. baumannii	Карбапенемы	47,7	93,0	92,9	96,4
	Аминогликозиды	38,5	90,1	10,7	71,4
	Панрезистентные	16,9	46,5	3,6	42,9
P. aeruginosa	Карбапенемы	51,6	60,2	91,7	91,7
	Цефалоспорины	82,9	71,0	100	100
	Аминогликозиды	45,7	28,0	50	66,7
	Панрезистентные	17,1	15,1	33	50
E. coli	Карбапенемы	68,1	14,9	100	66,7
	Цефалоспорины	80,9	51,1	50	83,3
	Фторхинолоны	93,6	83,0	50	66,7
	Аминогликозиды	61,7	8,5	50	0
	Панрезистентные	23,4	0	0	0

 

В ОРИТ ИБ в 2020 г. по сравнению с ОРИТ СБ этого же года резистентность K. pneumoniae к карбапенемам возросла на 15,7%, к цефалоспоринам – на 11,8%, к аминогликозидам – на 8,2%, в то время как в ОРИТ ИБ в 2021 г. по сравнению с ОРИТ СБ 2021 г. отклонения резистентности K. pneumoniae к карбапенемам незначительны, а к цефалоспоринам рост составил 10%, достигнув 100%, к аминогликозидам – 8,4%.

Резко выросла (на 45,2%) резистентность A. baumannii к карбапенемам в ОРИТ ИБ в 2020 г. по сравнению с ОРИТ СБ этого же года, в то время как рост резистентности в ОРИТ СБ в 2021 г. по сравнению с ОРИТ СБ в 2020 г. составил 45,3%. Кроме того, на 3,4% возросла и достигла 96,4% резистентности A. baumannii в ОРИТ ИБ в 2021 г. по сравнению с ОРИТ СБ этого же года.

Резистентность A. baumannii к аминогликозидам изменялась разнонаправленно: в 2021 г. она выше, чем в этом же подразделении в 2020 г., на 51,6%, а в ОРИТ ИБ – на 60,7%. В ОРИТ ИБ в 2020–2021 гг. отмечено снижение резистентности по сравнению с ОРИТ СБ этих же годов на 27,8 и 18,7% соответственно.

В ОРИТ ИБ в 2020–2021 гг. по сравнению с ОРИТ СБ этих же годов зафиксирован рост резистентности P. aeruginosa к карбапенемам – на 40,1 и 31,5%, к аминогликозидам – на 4,3 и 38,7%, к цефалоспоринам – 17,1 и 29%, достигнув в обоих случаях 100%.

Дополнительно у выделенных штаммов с резистентностью к карбапенемам, цефалоспоринам и аминогликозидам в 2021 г. проведено исследование наличия генов резистентности (табл. 3).

 

Таблица 3. Наличие генов карбапенемаз групп KPC, OXA, NDM у поли- и панрезистентных нозокомиальных штаммов K. pneumoniae в ОРИТ в 2021 г., %

АМП	ОРИТ СБ, n=31	ОРИТ СБ, n=31	ОРИТ СБ, n=31	ОРИТ СБ, n=31	ОРИТ ИБ, n=29	ОРИТ ИБ, n=29	ОРИТ ИБ, n=29	ОРИТ ИБ, n=29	ОРИТ ИБ, n=29
	OXA-48, 19,4	NDM и гр. OXA-48, 51,6	KPC и гр. OXA-48, 12,9	Не обнаружено, 9,7	OXA-48, 44,8	NDM и гр. OXA-48, 27,6	KPC и гр. OXA-48, 10,3	NDM, 6,9%	Не обнаружено, 6,9
Карбапенемы	100	62,5	75	100	76,9	100	66,7	100	100
Цефалоспорины	83,3	93,8	75	100	92,3	100	100	100	100
Аминогликозиды	33,3	43,8	50	100	61,5	75	33,3	50	100

Примечание. Изолированные гены NDM в ОРИТ СБ не обнаружены.

 

Ведущими у K. pneumoniae, выделенной от пациентов в ОРИТ СБ, являются гены NDM+OXA-48, в ОРИТ ИБ – OXA-48, которые впервые начинали определяться уже на 5-й день от начала антибактериальной терапии (АБТ). Параллельно определялась чувствительность штаммов K. pneumoniae с наличием генов резистентности к АМП на бактериологических анализаторах. Следует отметить, что в 2021 г. в ОРИТ ИБ в отношении продукции металло-β-лактамаз и сериновых карбапенемаз (NDM+OXA-48) резистентность к карбапенемам и цефалоспоринам достигала 100%.

Наличие генов карбапенемаз не всегда коррелировало с фенотипической резистентностью – в 6,9% наблюдений при наличии 100% резистентности к карбапенемам и цефалоспоринам гены не обнаружены. Это подтверждает, что механизм устойчивости энтеробактерий к карбапенемам связан не только с продукцией ферментов, а отсутствие генов, продуцирующих карбапенемазы, не является прямым показанием для назначения β-лактамных АМП ввиду возможного наличия других механизмов резистентности.

Согласно методическим рекомендациям 2021 г. [13], продуценты некоторых карбапенемаз (например, OXA-48-подобных), могут быть чувствительны к цефалоспоринам, что выявлялось в 7,7% случаев, а также в нашем исследовании. При этом полирезистентные штаммы K. pneumoniae, продуценты карбапенемаз, в ОРИТ ИБ в 2021 г. наиболее чувствительны к аминогликозидам – до 25% в случае продукции металло-β-лактамаз и сериновых карбапенемаз NDM+OXA-48, до 38,5% – при продукции сериновых карбапенемаз uheggs OXA-48. Однако при сравнении с определением чувствительности на бактериологических анализаторах отмечается чувствительность приведенных штаммов к аминогликозидам в этом же отделении сравниваемого периода до 42,1%, причем продукция β-лактамаз расширенного спектра действия и карбапенемаз у этих штаммов также подтверждалась с помощью бактериологических анализаторов.

По результатам санитарно-бактериологического исследования объектов госпитальной среды, выбранных в соответствии с методическими указаниями 4.2.2942-11 [14], в положительных пробах выявлен рост микроорганизмов тех же видов, что и в биоматериале от пациентов. При этом в смывах с поверхностей в ОРИТ СБ в 2020 г. высевались возбудители возможных нозокомиальных инфекций: A. baumannii – 3 раза, K. pneumoniae и P. aeruginosa – по 1 разу, грамположительные микроорганизмы (Staphylococcus epidermidis) – 7 раз. В ОРИТ СБ в 2021 г. высевались K. pneumoniae – 1 раз, S. epidermidis и Enterococcus faecalis – 2 и 1 раз соответственно, всего – 3 грамположительных микроорганизма. Их анализ ввиду небольшого количества проводить нецелесообразно.

Обсуждение

Понимание бремени устойчивости микроорганизмов к значимым группам АМП имеет решающее значение для принятия обоснованных и конкретных для каждого региона решений в отношении программ профилактики и борьбы с инфекциями, доступа к основным АМП, а также подчеркивает необходимость расширения возможностей микробиологических лабораторий и систем сбора данных в целях предотвращения угроз здоровью человека [15].

Надзор за потреблением АМП является важнейшим компонентом стратегии борьбы с устойчивостью микроорганизмов. Для того чтобы добиться выполнения главной задачи – снижения факторов риска развития резистентности, необходимо повсеместно выработать единую стратегию контроля распространения резистентных микроорганизмов. Главными условиями профилактики роста лекарственной устойчивости микроорганизмов являются: соблюдение принципов рациональной фармакотерапии бактериальных и грибковых заболеваний, уменьшение частоты инвазивных вмешательств, сокращение времени пребывания в стационаре, строгое выполнение соответствующего санитарно-противоэпидемического режима [16]. Низкое фармацевтическое качество АМП и субоптимальная их дозировка могут увеличивать заболеваемость и смертность, что также способствует развитию и распространению устойчивости к АМП в некоторых странах.

В мае 2015 г. на 68-й сессии Всемирной ассамблеи здравоохранения одобрен глобальный план действий по борьбе с устойчивостью к АМП, для реализации которого поставлено 5 стратегических целей:

1) повысить осведомленность и понимание устойчивости к АМП;

2) расширить знания посредством эпиднадзора и исследований;

3) снизить частоту инфицирования;

4) оптимизировать использование АМП;

5) разработать экономическое обоснование устойчивых инвестиций, учитывающих потребности всех стран, и увеличить инвестиции в новые лекарства, диагностические инструменты, вакцины и другие мероприятия [17].

В нашей стране сохраняется негативная практика назначения АМП вне показаний. Реализация Национальной стратегии предупреждения распространения антимикробной резистентности в Российской Федерации на период до 2030 г., принятой Правительством РФ в 2017 г., одним из основных пунктов обязывает информировать население и проводить образовательные мероприятия для фармацевтов и врачей. Как считают специалисты, необходимо продолжать развивать программы мониторинга резистентности, вовлекая в их финансирование государство, академические учреждения, общественные организации и фармацевтические компании, совершенствовать меры по осуществлению контроля оборота АМП, химических и биологических средств [3, 10, 16, 18].

Доминирование A. baumannii, выявленное в исследовании, с нарастанием поли- и панрезистентных штаммов в ОРИТ ИБ в 2021 г. соответствует современной общемировой тенденции и, очевидно, зависит от свойств бактерии – ее природной устойчивости и способности противостоять применяемым АМП.

Так, Acinetobacter spp. может выживать в условиях высыхания гораздо лучше, чем большинство других бактерий, обнаруживается даже в составе пыли и, согласно различным авторам, отличается высокой природной резистентностью к большинству АМП, хотя имеются существенные различия по антибиотикорезистентности штаммов в различных странах и регионах. Известно, что устойчивость A. baumannii к АМП может зависеть от приобретения им генов резистентности от других бактерий, в том числе находящихся с ним в биопленке, путем горизонтального переноса [19].

Настораживает и рост на 66% в ОРИТ ИБ выделений грибковой флоры рода Candida.

Вместе с тем проведенный анализ свидетельствует о том, что в одном или в смежных по профилю отделениях лечебного учреждения на протяжении времени могут присутствовать различные предположительно нозокомиальные микроорганизмы с неодинаковым набором генов резистентности и чувствительностью к АМП. Соответственно, требуется вести постоянный микробиологический мониторинг и паспорт лечебного отделения с обязательной регистрацией выделенных штаммов микроорганизмов и генов их резистентности [10, 18].

В свою очередь, научное сообщество считает, что АМТ не следует проводить без клинико-лабораторных признаков бактериальной инфекции, а период проведения эмпирической АМТ должен быть максимально коротким, не превышающим 48–72 ч [20, 21]. Большое значение (помимо анализа клинической ситуации) имеет мониторинг биологических маркеров воспалительного ответа – С-реактивного белка, прокальцитонина и др. [21, 22]. Назначение АБТ у пациентов с COVID-19 оправдано только при наличии веских признаков бактериальной инфекции, среди которых появление гнойной мокроты, повышение прокальцитонина крови более чем на 0,25–0,5 нг/мл, повышение уровня лейкоцитов крови более чем на 10 тыс./мкл с увеличением количества палочкоядерных нейтрофилов на 10% и более. Важно учитывать, что лейкоцитоз может быть обусловлен терапией глюкокортикостероидами, а не бактериальной инфекцией [12]. Вероятно, единственным убедительным признаком присоединения бактериального осложнения у больных с COVID-19 является выделение возбудителей инфекции из биоматериала критических локусов.

Заключение

Видовой состав и уровень антибиотикорезистентности микроорганизмов, выделенных от пациентов ОРИТ, коррелирует с таковым у штаммов, циркулирующих в больничной среде этих отделений. Персистенция антибиотикорезистентных штаммов в абиотической среде обязывает к осуществлению жесткого контроля соблюдения в ОРИТ санитарно-эпидемиологического режима, а также к разработке и внедрению в практику дополнительных мероприятий, направленных на разрыв путей передачи возбудителей нозокомиальных инфекций. Таким образом, микробиологический мониторинг, включая молекулярно-биологическую детекцию микроорганизмов, имеет важное значение для многопрофильного лечебного учреждения, в частности он позволяет на основании полученных данных анализировать закономерности распространения возбудителей, их структуру, уровни чувствительности к АМП, назначать адекватную эмпирическую АБТ, а также планировать санитарно-противоэпидемические мероприятия для предотвращения вспышек инфекционных заболеваний внутри лечебного отделения, учреждения.

Раскрытие интересов. Авторы декларируют отсутствие явных и потенциальных конфликтов интересов, связанных с публикацией настоящей статьи.

Disclosure of interest. The authors declare that they have no competing interests.

Вклад авторов. Авторы декларируют соответствие своего авторства международным критериям ICMJE. Все авторы в равной степени участвовали в подготовке публикации: разработка концепции статьи, получение и анализ фактических данных, написание и редактирование текста статьи, проверка и утверждение текста статьи.

Authors’ contribution. The authors declare the compliance of their authorship according to the international ICMJE criteria. All authors made a substantial contribution to the conception of the work, acquisition, analysis, interpretation of data for the work, drafting and revising the work, final approval of the version to be published and agree to be accountable for all aspects of the work.

Источник финансирования. Авторы декларируют отсутствие внешнего финансирования для проведения исследования и публикации статьи.

Funding source. The authors declare that there is no external funding for the exploration and analysis work.

About the authors

Nikolay B. Esaulenko

Burdenko Main Military Clinical Hospital

Author for correspondence.
Email: back.lab@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0002-3514-6814

doctor of the highest category, Department Head of Microbiology Center for Clinical Laboratory Diagnostics

Russian Federation, Moscow

Olga V. Tkachenko

Burdenko Main Military Clinical Hospital

Email: otkachenko84@mail.ru

bacteriologist of the Microbiology Department of Center for Clinical Laboratory Diagnostics

Russian Federation, Moscow

Sergey P. Kazakov

Burdenko Main Military Clinical Hospital; Russian Medical Academy of Continuous Professional Education

Email: gvkg.ckld@mail.ru
ORCID iD: 0000-0001-6528-1059

D. Sci. (Med.), Associate Professor, President

Russian Federation, Moscow; Moscow

Denis V. Davydov

Burdenko Main Military Clinical Hospital

Email: back.lab@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0001-5449-9394

D. Sci. (Med.), Prof.

Russian Federation, Moscow

Andrey A. Zaytsev

Burdenko Main Military Clinical Hospital; BIOTECH University; Russian University of Medicine

Email: a-zaicev@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0002-0934-7313

D. Sci. (Med.), Prof.

Russian Federation, Moscow; Moscow; Moscow

Sergey A. Chernov

Burdenko Main Military Clinical Hospital

Email: back.lab@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0001-5686-9053

D. Sci. (Med.)

Russian Federation, Moscow

References

Supplementary files